Kit Uji Asam Nukleat-2 SARS-CoV

Penggunaan yang dimaksudkan:

Kit Uji Asam Nukleat SARS-CoV-2 berlaku untuk deteksi kualitatif asam nukleat COVID-19 pada swab nasofaring, swab orofaringeal, dan dahak. Hasil tes memberikan dasar diagnosis molekuler untuk infeksi atau pasien yang dicurigai, dan tidak boleh digunakan sebagai satu-satunya kriteria untuk diagnosis klinis.

Bahan:

Prosedur pengetesan:

A. Persiapan Sampel

RNA yang diekstraksi adalah bahan awal untuk kit Uji Asam Nukleat-2 SARS-CoV.

Penting: Setiap prosedur ekstraksi asam nukleat harus dilakukan secara bersamaan dengan satu Kontrol positif (40 L, encerkan dengan larutan garam steril/PBS hingga volume yang diinginkan) dan satu kontrol Negatif (40 L, encerkan dengan larutan garam steril/PBS hingga volume yang diinginkan).

Disarankan untuk menggunakan kit ekstraksi asam nukleat komersial berikut: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Kit Mini RNA virus (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA Kit (TIANGEN);

B. Pengaturan Campuran Reaksi

1. Semua reagen dan sampel harus dicairkan sepenuhnya, dicampur sepenuhnya dan disentrifugasi sebentar pada suhu kamar (kisaran kisaran 18 hingga 25 derajat) sebelum digunakan.

2. Siapkan volume Campuran Reaksi yang diperlukan dalam tabung mikrosentrifus polipropilen berukuran tepat.

3. Pipet 25 L Campuran Reaksi ke dalam setiap sumur yang diperlukan dari pelat reaksi 96-sumur optik yang sesuai atau tabung reaksi optik yang sesuai.

C. Penambahan template

1. Tambahkan 5 L RNA yang diekstraksi dari Sampel/ Kontrol positif/ Kontrol negatif. Volume totalnya adalah 30 L.

2. Campur sampel dan kontrol secara menyeluruh dengan Campuran Reaksi dengan memipet ke atas dan ke bawah/Vortex.

3. Tutup 96-pelat reaksi sumur dengan penutup yang sesuai atau film perekat optik dan tabung reaksi dengan penutup yang sesuai.

4. Sentrifugasi 96-pelat reaksi sumur dalam sentrifus dengan rotor pelat mikrotiter selama 30 detik pada kira-kira 2500rpm.

D. Memprogram Instrumen PCR Waktu Nyata

Untuk informasi dasar mengenai penyiapan dan pemrograman berbagai instrumen PCR real-time, silakan merujuk ke manual pengguna masing-masing instrumen. Pengujian telah dioptimalkan untuk sistem PCR Real-Time ABI7500. Proses PCR dilakukan dengan kondisi bersepeda seperti yang dijelaskan pada tabel di bawah ini.

Tentukan detektor fluoresensi

*Harap setel referensi internal fluoresensi instrumen ke "Tidak Ada", misalnya: Untuk instrumen seri ABI, setel "Referensi Pasif" ke "Tidak Ada".

E. Analisis data

Silakan atur parameter analisis dan analisis data sesuai dengan instruksi pengoperasian instrumen yang relevan.

Ambil ABI 7500 sebagai contoh:

Baseline harus disetel ke rentang yang menghilangkan fluoresensi latar belakang yang ditemukan pada siklus awal amplifikasi, tetapi tidak tumpang tindih dengan area di mana sinyal amplifikasi naik di atas latar belakang(Nilai awal:3~10; Nilai akhir: {{2} }). Ambang Siklus (Ct) harus berada di dasar fase eksponensial. Klik "Analisis" untuk mendapatkan hasil analisis secara otomatis, dan baca hasil deteksi di jendela "Laporkan".

Tag populer: sar - cov-2 nukleat asam tes kit, Cina, pemasok, produsen, pabrik, dalam jumlah besar