Adenovirus Rapid Test- Sekresi Hidung
SARS-CoV-2 Kit Uji Asam Nukleat berlaku untuk deteksi kualitatif asam nukleat COVID-19 pada usap nasofaring, usap orofaring, dan dahak. Hasil tes memberikan dasar diagnosis molekuler untuk infeksi atau pasien yang dicurigai, dan tidak boleh digunakan sebagai satu-satunya kriteria untuk diagnosis klinis.
Deskripsi
Penggunaan yang dimaksudkan:
SARS-CoV-2 Kit Uji Asam Nukleat berlaku untuk deteksi kualitatif asam nukleat COVID-19 pada usap nasofaring, usap orofaring, dan dahak. Hasil tes memberikan dasar diagnosis molekuler untuk infeksi atau pasien yang dicurigai, dan tidak boleh digunakan sebagai satu-satunya kriteria untuk diagnosis klinis.
Bahan:
Meterial | Spesifikasi | Warna tutup | Komposisi |
COVID-19 Campuran Reaksi | 1165µL ×1 tabung | Cokelat | Buffer, dNTP, Primer, Probe. |
COVID-19Campuran Enzim | 85µL ×1 tabung | Biru | Taq DNA polimerase, Reverse Transcriptase, UDG |
Kontrol positif | 200 uL ×1 tabung | Kuning | Pseudovirus dari gen Target dan IC |
Kontrol Negatif | 200µL×1 tabung | Tanpa warna | ddH2O |
Prosedur pengetesan:
A. Persiapan Sampel
RNA yang diekstraksi adalah bahan awal untuk Kit Tes Asam Nukleat SARS-CoV-2.
Penting: Setiap prosedur ekstraksi asam nukleat harus dilakukan secara bersamaan dengan satu kontrol Positif (40 μL, encerkan dengan larutan salin steril/PBS hingga volume yang diinginkan) dan satu kontrol Negatif (40 μL, encerkan dengan larutan garam steril/PBS hingga volume yang diinginkan).
Direkomendasikan untuk menggunakan kit ekstraksi asam nukleat komersial berikut: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Viral RNA Mini kit (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA Kit (TIANGEN);
B. Pengaturan Campuran Reaksi
1. Semua reagen dan sampel harus dicairkan sepenuhnya, dicampur sepenuhnya dan disentrifugasi sebentar pada suhu kamar (kira-kira berkisar 18 hingga 25 derajat) sebelum digunakan.
2. Siapkan volume Campuran Reaksi yang diperlukan dalam tabung mikrosentrifus polipropilena dengan ukuran yang tepat.
3. Pipet 25 µL Campuran Reaksi ke dalam masing-masing sumur yang diperlukan dari pelat reaksi 96-sumur optik yang sesuai atau tabung reaksi optik yang sesuai.
C. Penambahan template
1. Tambahkan 5 μL RNA yang diekstraksi dari Sampel/Kontrol positif/Kontrol negatif. Volume totalnya adalah 30 μL.
Pengaturan Reaksi | |
COVID-19 Campuran Reaksi | 23.3µL |
COVID-19Campuran Enzim | 1.7 µL |
Sampel atau Kontrol | 5 µL |
Jumlah Volume | 30µL |
2. Campur sampel dan kontrol secara menyeluruh dengan Campuran Reaksi dengan memipet ke atas dan ke bawah/Vortex.
3. Tutup pelat reaksi sumur 96-dengan penutup yang sesuai atau film perekat optik dan tabung reaksi dengan penutup yang sesuai.
4. Sentrifuge pelat reaksi 96-sumur dalam sentrifugal dengan rotor pelat mikrotiter selama 30 detik dengan kecepatan sekitar 2500rpm.
D. Pemrograman Instrumen PCR Real-Time
Untuk informasi dasar mengenai penyetelan dan pemrograman instrumen PCR real-time yang berbeda, lihat panduan pengguna masing-masing instrumen. Pengujian telah dioptimalkan untuk sistem PCR Real-Time ABI7500. Jalankan PCR dilakukan dengan kondisi bersepeda seperti yang dijelaskan pada tabel di bawah ini.
Tidak. | Panggung | Suhu | Durasi | Siklus | Pengumpulan data |
1 | Membalikkan reaksi transkripsi | 50 derajat | 10 menit | 1 | / |
2 | Pra-denaturasi | 95 derajat | 30 detik | 1 | / |
3 | Daturasi | 95 derajat | 10 detik | 45 | / |
Anil dan ekstensi | 58 derajat | 30 detik | Pengumpulan fluoresensi titik akhir |
Tentukan detektor fluoresensi
Target | Nama Detektor | Reporter | Minuman |
RNA spesifik COVID-19 | Gen sasaran ORF1ab | keluarga | Tidak ada |
Gen target N | HEX/VIC | Tidak ada | |
Gen target E | ROX | Tidak ada | |
Kontrol Internal | Gen pembantu rumah tangga | Cy5 | Tidak ada |
*Silakan setel referensi internal fluoresensi instrumen ke "Tidak Ada", misalnya: Untuk instrumen seri ABI, setel "Referensi Pasif" ke "Tidak Ada".
E. Analisis data
Silakan atur parameter analisis dan analisis data sesuai dengan petunjuk pengoperasian instrumen yang relevan.
Ambil ABI 7500 sebagai contoh:
Baseline harus diatur ke rentang yang menghilangkan fluoresensi latar belakang yang ditemukan pada siklus awal amplifikasi, tetapi yang tidak tumpang tindih dengan area di mana sinyal amplifikasi naik di atas latar belakang (Nilai awal:3~10; Nilai akhir: {{2} }). Ambang Batas Siklus (Ct) harus berada di dasar fase eksponensial. Klik "Analisis" untuk mendapatkan hasil analisis secara otomatis, dan baca hasil deteksi di jendela "Laporan".
Tag populer: tes cepat adenovirus-sekresi hidung, Cina, pemasok, produsen, pabrik, massal
Kirim permintaan
Anda Mungkin Juga Menyukai









